產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
空腸彎曲桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Campylobacter jejuni | EY00P8774 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL陽性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
2-氨苯-5-磺酸3,5-二-L- DI-IODO-L-TYROSINE(P) Iron (III) oxide
5-(2-溴乙基)-2,3-二氫苯并呋喃3,5-二-L- DI-IODO-L-TYROSINE(P) ron powder reduced
苯甲酰基二茂鐵3,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG) Isophorone
2-氨基-4-磺?;?,3'-二吲哚 DI-INDOLYLMETHANE, 3,3'-(RG) Isovanillin
N,N-二甲基二茂鐵DIIODO-L-THYRONINE, 3,3'-(RG)(REQUEST QUOTE) Isovanillin
乙烯基二茂鐵3,5-二甲腺氨酸 DIIODO-L-THYRONINE, 3,5-(RG)(REQUEST QUOTE) Itaconic acid
3,4-二氯代苯磺酰氯3,5-二甲腺氨酸 DIIODO-L-THYRONINE, 3,5-(P) Jenner's stain
1-氯乙基異基碳酸酯(1-氯乙基碳酸異酯)DIIODO-L-THYRONINE, 3,3'-(P) KT-5823
2,4,7,9-四甲基-5-癸炔-4,7-二2,3-二甲氧基-2'-羥基查耳酮 DIMETHOXY-2'-HYDROXYCHALCONE, 2,3-(RG) L(-)-Arabitol
3-氯異甲酯2,6-二甲氧基對(duì)苯二酚 DIMETHOXYHYDROQUINONE, 2,6-(RG)(PLEASE CALL) L-(-)DBTA, Dibenzoyl-L-tartaric acid, monohydrate
4--2-甲氧基吡啶5,7-二甲氧基木犀草啶 DIMETHOXYLUTEOLINIDIN, 5,7-(SH) Lactobionic acid
4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-1-烯-1-基)-1,3,2-二氧戊環(huán)5,7-二甲氧基木犀草啶 DIMETHOXYLUTEOLINIDIN, 5,7-(SH) L-Amino acid oxidase >4 U/mg
3,5-二氯-4-氟苯甲酸DIMETHOXYHYDROQUINONE, 2,3-(RG)(PLEASE CALL) L-Amino acid oxidase >4 U/mg
4-氨基-3,5-二吡啶NOR-9-CARBOXY-DELTA 9 THC, (+/-)-11-(SH)(PLEASE CALL) Lanthanum (III) acetate, pentahydrate
4-乙氧基-3-氟7,8-二甲氧基黃酮 DIMETHOXYFLAVONE, 7,8-(RG) L-Canavanine sulfate salt
空腸彎曲桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒Toll樣受體6(TLR6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)/硫酸基長(zhǎng)春堿 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定1ml(500X)
髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)/硫酸基長(zhǎng)春堿 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 3×1ml
多巴受體D5(DRD5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)/硫酸基長(zhǎng)春堿 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)6次/盒
鈣調(diào)磷酸酶(CaN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)/硫酸基長(zhǎng)春堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品100ml
胱天蛋白酶12(CASP12)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)帕唑帕尼 質(zhì)量規(guī)格:溶解性數(shù)據(jù)為19.8,分子量小于5000500 ml
熱休克轉(zhuǎn)錄因子4(HSF4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)帕唑帕尼 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR6次/盒
酮酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)/非氯地平 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%(HPLC),BR,一水合物
Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)/非氯地平 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品100ml