產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
神經(jīng)肉孢子蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Sarcocystis neurona | EY00P9336 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
富馬酸酮替芬(標準品)無水三氯化鐵 ≥99.9% metals basisHuman RARS(Arginyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit
己內(nèi)酰(標準品)無水三氯化鐵 AR,98%Human RARα(Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit
磷酸苯哌啉(標準品)1,2,4,5-四 95%Human PRR4(Proline Rich Protein 4, Lacrimal) ELISA Kit
(標準品酯 AR,99% Human PRSS23(Protease, Serine 23) ELISA Kit
尼爾雌(標準品)乙酯 CP,98% Human RB1(Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit
7-羥基-4-甲基(標準品)乙肟 99%Human PRSS33(Protease, Serine 33) ELISA Kit
7-羥基-4-甲基酮肟 98%Human PTGIS(Prostaglandin I Synthase) ELISA Kit
(標準品)丁酮肟 99%Human REPIN1(Replication Initiator 1) ELISA Kit
(標準品)環(huán)己酮肟 97%Human PTP1B(protein tyrosine phosphatase 1B) ELISA Kit
(標準品)羥基乙酰 98%Human RIPK2(Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit
鈉(標準品)羥-O-磺酸 97%Human RLN2(Relaxin-2) ELISA Kit
(標準品)肟 98%Human PTPRJ(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA Kit
;氮酮硝酸釓,六水 AR,99%Human PTPN14(protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 14) ELISA Kit
(標準品)硝酸釓,六水 99.99% metals basisHuman PYGL(Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA Kit
依他尼酸(標準品)硝酸釓,六水 99.999% metals basisHuman PYGM(Glycogen Phosphorylase, Muscle) ELISA Kit
神經(jīng)肉孢子蟲探針法PCR熒光定量試劑盒血管緊張素Ⅱ受體1(AGTR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)四氧化三鐵(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)氧化鐵(III)(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,標準品
肌球蛋白重鏈7(MYH7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)正磷酸鐵(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
細胞色素P450家族成員11B1(CYP11B1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)還原鐵粉(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
甲腺原氨酸脫酶Ⅰ(DIO1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-溴代異戊烷(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
甲腺原氨酸脫酶Ⅲ(DIO3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)異佛爾酮(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RNA結合基元蛋白20(RBM20)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)異(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR
RNA結合基元蛋白24(RBM24)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)異香草(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:含量測定