服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 足馬杜拉分枝菌探針法PCR熒光定量試劑盒 |
英文名稱 | Madurella mycetomatis |
貨號(hào) | EY00P9082 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
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實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
BOC-D-鹽酸鹽生脈提取物(標(biāo)準(zhǔn)品) 4,5-Difluorophthalonitrile
BOC-D-鹽酸鹽勝紅薊(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Hexyloxyphthalonitrile
Nα-BOC-D-鹽酸鹽一水合物圣草次苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Hydroxyphthalonitrile
Boc-Arg(Mts)-OH·CHA圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Nitrophthalonitrile
Boc-Arg(Mts)-OH·CHA蓍草(標(biāo)準(zhǔn)品) 3-Nitrophthalonitrile
BOC-硝基-L-十七碳酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Phthalonitrile
BOC-硝基-L-石菖蒲(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Propoxyphthalonitrile
BOC-硝基-L-石吊蘭(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Pentyloxyphthalonitrile
N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺?;?-L- Tetrafluorophthalonitrile
N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺?;?-L- 石斛酚(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,2-Naphthalenedicarbonitrile
N-叔丁氧羰基-N'-甲苯磺?;?-L- 石斛堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile
BOC-對(duì)磺酰-D-石見穿(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Aza-15-crown 5-Ether
BOC-對(duì)磺酰-D-石椒草(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Aza-18-crown 6-Ether
BOC-對(duì)磺酰-D-石榴皮(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Aza-12-crown 4-Ether
叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天門冬酰石榴皮鞣素;安石榴林(標(biāo)準(zhǔn)品) 4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether
足馬杜拉分枝菌探針法PCR熒光定量試劑盒基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR500ML
基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR500ML
基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鈉一水物 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),BR500ML
S100鈣結(jié)合蛋白(S100)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鈉一水物 質(zhì)量規(guī)格:0.98500ML
角蛋白1(KRT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR500ML
胰島素降解酶(IDE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:0.98500ML
Lacritin蛋白(LACRT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:0.98500ML
皮敵菌素(DCD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR500ML
熒光定量PCR服務(wù):
公司推出,該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn),目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化;比較不同組織的mRNA表達(dá)差異;驗(yàn)證基因芯片,siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù),全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成,主要定量PCR儀器。
1、熒光定量PCR服務(wù)要求:
(01)請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料;或直接提供純化好的總RNA(大于 5 ug/樣品);或直接提供純化好的DNA(大于 5 ug/樣品)。
(02)請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。
(03)請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料:DNA/RNA 來源等
2、熒光定量PCR操作程序
(01)引物(探針)設(shè)計(jì)與合成。
(02)提取DNA/RNA,樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
(03)進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。
(04)實(shí)驗(yàn)完成后,提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告(含軟件分析結(jié)果)及引物等實(shí)驗(yàn)材料。
3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):
我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告?
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
枝頂孢霉探針法PCR熒光定量試劑盒 | Acremonium strictum | EY00P8638 |
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
4-乙氧基-2,3-二氟黃芪黃酮標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASTRAGALUS FLAVONOID STANDARDS KIT(SH) Cilostazol
2-溴-5-(2-辛基十二烷基)噻吩黃芪皂苷標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASTRAGALUS SAPONIN STANDARDS KIT(SH) Cisplatin
3-[2-(Boc-氨基)乙基]氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽黃芪皂苷標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASTRAGALUS SAPONIN STANDARDS KIT(SH) Cisplatin
3-Boc-氨甲基氮雜環(huán)丁烷鹽酸鹽朝鮮薊標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ARTICHOKE STANDARDS KIT(P) Cisplatin
1H-吡唑基[3,4-B]吡啶-3-羧酸朝鮮薊標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ARTICHOKE STANDARDS KIT(P) Cladribine
N-Boc-3-溴-氮雜環(huán)丁烷棗標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 JUJUBE STANDARDS KIT(P) Clarithromycin
1-烯基環(huán)磺酰氯棗標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 JUJUBE STANDARDS KIT(P) Clarithromycin
3-酸基-5-氟-4-甲酸常春藤標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 IVY STANDARDS KIT(SH) Clindamycin Phosphate
2,4-二氟-5-溴苯山楂標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HAWTHORN STANDARDS KIT(P) Clindamycin Phosphate
1-溴-3-氯-4-乙氧基-2-氟苯山楂標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HAWTHORN STANDARDS KIT(P) Clofarabine
2,6,7-三氯-3-三氟甲基喹喔啉藤黃標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GARCINIA STANDARDS KIT(P) Clotrimazole
2-氯吡-3-羧酸馬栗樹標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HORSE CHESTNUT STANDARDS KIT(SH) Clotrimazole
4-溴-2-氯-6-氟苯甲哈爾滿生物堿標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 HARMANE ALKALOIDS STANDARDS KIT(RG) Colchlcine
5-氯-3-羥基異噻唑生姜標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) Colchlcine
3-氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯生姜標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 GINGER STANDARDS KIT(P) Colistin Sulphate
枝頂孢霉探針法PCR熒光定量試劑盒趨化因子C-C-基元配體3樣蛋白1(CCL3L1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品¥600.00
紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:純度>99,USP100mL
紅細(xì)胞生成素(EPO)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品100mL
紅細(xì)胞生成素(EPO)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:> 98%,水合物標(biāo)準(zhǔn)品100mL
E選擇素(SELE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98.5%,BR,二水合物100mL
E選擇素(SELE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%100mL
凋亡相關(guān)因子(FAS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醋酸增血壓素 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品100mL
凋亡相關(guān)因子(FAS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)醋酸增血壓素 質(zhì)量規(guī)格:>98% 100mL