人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟注意事項：
1．基礎程序；
2．擴增溫度和延伸溫度；
3．反應時間；
4．循環(huán)次數；
5．PCR 反應液的配制；
6．PCR技術的基本原理；
7．PCR的反應動力學；
8．PCR擴增產物；
9．PCR反應體系與反應條件。

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以下是人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟的詳細說明書：

使用方法：
注：人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。

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 Raji，人Butt's淋巴瘤細胞

HAN 人羊膜細胞

CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R107大鼠海馬神經元細胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠間充質干細胞-骨髓MMSC-bm

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0919 人成骨細胞*培養(yǎng)基 100mL

CL-0048Ca Ski(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2

BTLA Others Cynomolgus 食蟹猴 BTLA 人細胞裂解液 (陽性對照)

溶液 200 mML-Gue

SNU-398細胞，人肝癌細胞 人類胚胎腎臟表皮細胞,H293T細胞 視網膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

大耳山羊腎細胞;LDG-2

SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人細胞裂解液 (陽性對照)

Raji，人Butt's淋巴瘤細胞

HAN 人羊膜細胞

CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R107大鼠海馬神經元細胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠間充質干細胞-骨髓MMSC-bm

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0919 人成骨細胞*培養(yǎng)基 100mL

厭氧培養(yǎng)液250g用于厭氧菌增菌培養(yǎng)

10%化胰酪胨大豆肉湯 10% NaCl Tryptic Soy Broth 用于金黃色葡萄球菌的MPN測定，增菌培養(yǎng)(GB2008標準)

牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250 培養(yǎng)基原材料，提供細菌生長所需的生長因子

強化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)incubationmedia強化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)

甲基紅指示劑盒 5ml*2 用于甲基紅試驗

3%氯三糖鐵瓊脂2550g用于副溶血性弧菌的生化反應。(GB、SN)

4121-prf EpiCM-2-prf 上皮細胞培養(yǎng)基-2 500 ml incubation media 4121-prf EpiCM-2-prf 上皮細胞培養(yǎng)基-2 500 ml

Trypticase(Tryptic)SoyBroth

6.5%NaClDextroseAgar

TM培養(yǎng)基 250g 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)

人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟EC-MUGMedium

亞鹽還原厭氧菌孢子液體培養(yǎng)基 用于亞鹽還原厭氧菌孢子的增菌培養(yǎng)。

YM肉湯 YM Broth 250克 BR

哥倫比亞MUG培養(yǎng)基250用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標準)incubationmedia哥倫比亞MUG培養(yǎng)基250用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標準)

Nutrientagarslant

需要自備的器材：
1．人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。