公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
肺癌細胞;0225-02Sp | 貼壁生長 | EY-X63983 |
細胞名稱 肺癌細胞;0225-02Sp
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBS
傳代方法: 1:3~1:8傳代;每周2~5次。
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
I型前膠原檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -Procollagen Type I
L-谷氨脫氫酶檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -L-Glutamate dehydrogenase
N2乙酰膽受體IgG檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -N2-AChR IgG
N2乙酰膽受體IgG1檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -N2-AChR IgG1
N2乙酰膽受體IgG2檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -N2-AChR IgG2
Phospho (637)-DRP1檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -Phospho
Pim-2原癌基因檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -PIM2
pro-MMP-9檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -Pro-Matrix metalloproteinase 9
PTEN;MMAC1檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -PTEN;MMAC1
Qa淋巴細胞抗原2檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -Qa-2
RAS癌基因家族成員RAB5a檢測試劑盒生長特性: 體內生長培養(yǎng)條件: -Member RAS Oncogene Family RAB5a
R-脊椎蛋白2檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSR-spondin-2
S100鈣結合蛋白A4檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSS100A4
SH3YL1檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSSH3 domain-containing YSC84-like protein 1
TβRII檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSTβRII
USP21檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSUbiquitin carboxyl-terminal hydrolase 21
WNT1可誘導信號轉導途徑蛋白1檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSWISP1
肺癌細胞;0225-02Sp地膚子皂苷Ic96990-18-0英文名:Momordin Ic
英文別名:28-Noroleanane, β-D-glucopyranosiduronic acid deriv
CAS登錄號:96990-18-0
分子式:C41H64O13
分子量:764.93
分子結構:
外觀:類白色結晶粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等
提取來源:為藜科一年生草本植物地膚子Kochia scoparia(L.)Schrad 的成熟果實
熔點:238-240℃
藥理藥效:具有清熱利濕、祛風止癢等功效,地膚子皂苷Ic(Momordin Ic)為其抗瘙癢,抗炎和抗過敏作用的主要有效成分。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。