綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲(chǔ)存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
巴氏芽孢桿菌規(guī)格 | Bacillus p | EY-J963630 |
資源名稱: 巴氏芽孢桿菌
種屬: Bacillus pasteurii
提供形式: 凍干粉
安全等級: 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: CASO +20g/L尿素:蛋白胨 5.0 g,牛肉浸膏 3.0 g , 尿素 20.0 g ,蒸餾水 1.0 L,pH 7.3 。121℃,15min。
生長條件: 30℃,好氧
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
Streptomyces│antibioticus 中文名稱:抗生素鏈霉菌Streptomyces│antibioticus分離基物:土壤/死椰子樹芯覆土提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Albidovulum│xiamenense 中文名稱:廈門白卵狀菌Albidovulum│xiamenense分離基物:樣/表層溫泉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;端微生物/嗜熱菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:50℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Paenibacillus│taichungensis 中文名稱:臺(tái)中類芽孢桿菌Paenibacillus│taichungensis分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Marinobacr│gudaonensis 中文名稱:孤島海桿菌Marinobacr│gudaonensis分離基物:樣/深層海提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.烷烴及芳烴類降解菌,可用于生物修復(fù);2.可用于生物催化;3.可用于篩選生物活性物質(zhì);4.可用于海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Cupriavidus│metallidurans 中文名稱:耐重金屬貪銅菌Cupriavidus│metallidurans分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Halomonas│lua 中文名稱:橙色鹽單胞菌Halomonas│lua分離基物:沉積物/土黃色沉積物5-10cm提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1、海洋石油污染生物修復(fù); 2、生物活性物質(zhì)篩選。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Halomonas│elongata 中文名稱:伸長鹽單胞菌Halomonas│elongata分離基物:生物樣/曬鹽廠設(shè)備表面提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:20-30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Streptomyces│olivochromogenes 中文名稱:橄欖產(chǎn)色鏈霉菌Streptomyces│olivochromogenes分離基物:土壤/近海紅樹林土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可作抗菌活性及抗腫瘤活性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
巴氏芽孢桿菌規(guī)格Os05g0477200 protein 水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體川楝素4-羥基-3-甲基吡Human FG (Fibrinogen) ELISA Kit
oxytocin receptor 催產(chǎn)素受體(受體)抗體川芎2--3-甲基-5-硝基吡Human FDP (Fibrinogen Degradation Product) ELISA Kit
OVA 雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體鹽川芎2--3-甲基-5-硝基吡Human FPA (Fibrinopeptide A) ELISA Kit
Orexin receptor 1/2 食欲素受體抗體異鼠李素6--2-甲基-3-硝基吡Human FPB (Fibrinopeptide B) ELISA Kit
P2P-R/RBBP6 增殖潛能相關(guān)蛋白抗體D-(+)-木糖6--2-甲基-3-硝基吡Human SSTR2 (Somatostatin Receptor 2) ELISA Kit
P14ARF 抑癌基因p14抗體積雪草苷6--2-甲基-3-硝基吡Human PHLDA2 (Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2) ELISA Kit
P16 抑癌基因p16抗體羥基積雪草苷2-氨基-5-硝基-6-甲基吡Human PAF (Plaet Activating Factor) ELISA Kit
P19ARF p19ARF抑癌基因抗體積雪草2-氨基-5-硝基-6-甲基吡Human PAFAHIB3 (Plaet Activating Factor Acetylhydrolase Ib3) ELISA Kit